Tout d'abord, il faut savoir qu'il est pratiquement impossible de sexer de jeunes axolotls. On attend généralement qu'ils aient atteint la maturité sexuelle pour déterminer s'il s'agit de mâles ou de femelles.
Maturité sexuelle Cette étape du développement n'apparaît pas en même temps pour tout les axolotls. La qualité de leur maintenance y est pour beaucoup. Toutefois, un axolotl bien élevé atteint généralement la maturité sexuelle entre 6 mois à 1 an. Chez les leucistiques et les albinos, elle se reconnaît par le bout des doigts foncés (noirs) alors que chez les sauvages et les mélaniques, elle se traduit par le bout des doigts plus clairs (généralement moins visible).
Sexage Le sexage chez les adultes est assez simple. Le mâle a le cloaque gonflé, contrairement au femelle. (Le cloaque est l'orifice commun des voies intestinales, urinaires et génitales)